Kombination von Yeast-Surface Display UPOs mit H2O2 Direktsynthese

Kontaktpersonen: Peters, Till (till.peters@kit.edu, +4972160826716), Niklas Teetz (niklas.teetz@kit.edu)
Institut: IMVT, BLT
Start: Mai 2024


Hintergrund und Motivation

Die Nutzung von Enzymen in industriellen Prozessen hat in den letzten Jahren erheblich an Bedeutung gewonnen. Besonders die Peroxygenasen, wie die aus Agrocybe aegerita stammende unspezifische Peroxygenase (AaeUPO), haben sich als äußerst vielseitige Biokatalysatoren erwiesen. Die Immobilisierung von Enzymen ist dabei ein verbreitetes Verfahren in der Biotechnologie, da es hinsichtlich der Handhabbarkeit dieser in Reaktoren von Vorteil ist und die Prozessführung erleichtert. Das Yeast-Surface Display ist eine spezielle Methode zur Immobilisierung von Enzymen, bei der Hefe (Pichia pastoris) als Träger verwendet wird. Es ist eine effektive und attraktive Methode, um die UPOs zu immobilisieren und diese technisch in kontinuierlichen Prozessen verwendbar zu machen.
Peroxygenasen sind von Wasserstoffperoxid (H2O2) als Cosubstrat abhängig, welches konventionell teuer und umweltschädlich mittels des Anthrachinonverfahren hergestellt wird. Daher ist die Entwicklung nachhaltiger Herstellungsmethoden für H2O2 von großer Bedeutung. Mit dezentralen Systemen zur Direktsynthese aus Wasserstoff und Sauerstoff lässt sich H2O2 bedarfsorientiert in-situ für Prozesse wie die Enzymkatalyse mit Peroxygenasen herstellen. Die Anwendung der auf Hefe immobilisierten UPOs in einem Festbettreaktor mit in-situ H2O2-Direktsynthese verspricht einen effektiven kontinuierlichen Produktionsprozess, der im Zuge dieser Arbeit etabliert und charakterisiert werden soll.


Inhalt der Arbeit
•    Fermentation von Pichia pastoris im Bioreaktor zur Enzymherstellung (BLT)
•    Identifizierung eines geeigneten Prozessfensters für die Tandemkatalyse (IMVT)
•    Durchführung der Tandemkatalyse im kontinuierlich betriebenen Festbettreaktor  (IMVT)
•    Bilanzierungen beider Prozessschritte (BLT, IMVT)


Die Masterarbeit bietet die Möglichkeit, in einem interdisziplinären Forschungsumfeld zu arbeiten und einen wichtigen Beitrag zur Entwicklung nachhaltiger Katalyseprozesse zu leisten. Dabei wird sie sowohl am Campus Süd (BLT) und am Campus Nord (IMVT) stattfinden.


Referenten: Prof. Dr.-Ing. Dirk Holtmann (BLT), Prof. Dr. Roland Dittmeyer (IMVT)
Betreuer: Niklas Teetz (BLT), Till Peters (IMVT)